枯草芽孢杆菌的启动子筛选
2016/8/16 10:04:01点击：
枯草芽孢杆菌因其独特的代谢途径、常被用于合成生物学和代谢工程，因此，需要对其内在生物部件进行评估，目的是确定最佳策略来调节代谢通路和表达目标蛋白。通过报告基因表达量（如绿色荧光蛋白的荧光单位）评估启动子强弱是一种常用方法。中国科学院天津工业生物技术研究所张大伟课题组对枯草芽孢杆菌的启动子作了筛选与鉴定，相关结果发表在《PLOS ONE》杂志上。
在这项研究中，研究人员测试了84个、分布在不同蛋白上游的预测启动子，不同蛋白包括热激蛋白和细胞壁蛋白等。测试发现84个启动子的活性是最强启动子P43的0.0023-4.53倍不等。这些启动子在高温或是有乙醇的培养基中的活性变化不大，但有些在高渗透压下活性有所提高。从中随机挑选了启动子用于启动耐热β-半乳糖苷酶的表达，结果发现转录水平相当，说明这些启动子可在不同遗传背景下发挥作用。此外，从中挑选的启动子可使胞质β-半乳糖苷酶和α-淀粉酶（分泌蛋白）的转录分别提高4倍和2倍。这项研究所得到的数据使得我们对枯草芽孢杆菌的代谢有了更深的了解，便于我们今后对它的改造利用。
在这项研究中，研究人员测试了84个、分布在不同蛋白上游的预测启动子，不同蛋白包括热激蛋白和细胞壁蛋白等。测试发现84个启动子的活性是最强启动子P43的0.0023-4.53倍不等。这些启动子在高温或是有乙醇的培养基中的活性变化不大，但有些在高渗透压下活性有所提高。从中随机挑选了启动子用于启动耐热β-半乳糖苷酶的表达，结果发现转录水平相当，说明这些启动子可在不同遗传背景下发挥作用。此外，从中挑选的启动子可使胞质β-半乳糖苷酶和α-淀粉酶（分泌蛋白）的转录分别提高4倍和2倍。这项研究所得到的数据使得我们对枯草芽孢杆菌的代谢有了更深的了解，便于我们今后对它的改造利用。
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